工作原理：流动相通过输液泵流经进样阀，与样品溶液混合，流经色谱柱，在色谱柱中进行吸附、分离，***每一组分分别经过检测器转变为电讯号，在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱的使用：首先对样品进行预处理，然后进样，进样完毕后，清洗进样口，每次分析结束后，清洗通道，***关闭仪器。液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在气相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。注意事项：液相色谱系统是比较复杂的精密仪器，使用的时候操作步骤一定要正确液相色谱系统分析检验后一定要清洗，才能保证刮膜蒸发器的使用寿命故障的处***泡溢出流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法***不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。

        　　国外**的仪器生产厂家的产品也是整体开发的，所以能够保证仪器的整体水平。　　四、稳定可靠，故障率低　　1、色谱柱的使用说明：　　(1)色谱柱使用前注意事项：　　色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用 10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。　　(2)流动相：　　流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45m 的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容 器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。以常规硅胶为基质的键合相填料通常的 PH 值适用范围是 2.0-8.0，BDS C18 适合于碱性化合物，PH 值适用范围为 2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于 色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。　　(3)样品：　　样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。　　2、色谱柱的保存　　(1)反相色谱柱每天实验后的保养：　　使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用 10%的甲醇/水冲洗 30 分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗 30 分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入 10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

        如果某个部件发生漏液，那就是故障所在。漏液的原因分两种：　　1、接触硬件不当　　在更换零件如流路管或换柱时，换的接头接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的，甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选项用PEEK接头是一较好是一个较好的解决方法，不仅通用性好，而且靠手拧就能保证不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不当也会漏液，一种不当就是力度把握不好，拧得太紧或太松;　　另一种不当就是致命的错误：滑丝，这往往是动手能力不太强，螺丝钉很少拧的工作者犯的错误，滑丝的后果不仅是漏液那么简单，常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验，那就是拧螺丝。　　2、使用仪器不当　　只要互相有10%比例就不会出现这个问题。另一原因是在用缓冲液盐溶液(不论甲醇含量有多少)作流动相时，实验结束后没有换甲醇水冲洗，使得微渗的流动相干燥形成晶体造成。不过，输送泵漏液并不是非得马上修不可，冲洗干净并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。检测器漏液是个很麻烦的事，一般都是吸收池的问题，更换的费用相当高。但是并不是说一定要马上更换，还可以从实际实验效果看能否凑合使用。　　漏气，漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部了的气体进入刮膜蒸发器的流路内部形成气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。　　(1)过滤头　　做油液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气(需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率)，如果已脱气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。

        液相泵的日常维护泵的密封圈是**易磨损的部件，密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动；单向阀的正常工作至关重要，它若发生故障，将直接影响流速的稳定性。日常维护应注意以下几点：①防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环等，泵的入口应经常清洗或更换。②使用液质联用级（LCMS级）的溶剂和试剂，实验用水应为超纯水，并通过滤膜过滤；②压力不要超过规定的比较高压力，否则会使高压密封环变形漏液。；③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净，防止盐沉积，系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中；④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。⑤要防止溶剂瓶内的流动相用完，空泵运转会磨损柱塞或密封环，**终产生漏液。⑥流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内。尤其是在停泵过长时间情况下。由于溶液静置，就可能析出盐的微细晶体。同样会损坏密封环、柱塞等。因此，必须泵入纯水将泵充分清洗。再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂。

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